流式细胞技术样品制备方法。

1. 细胞收集：收集浓度1~5×10⁶个/mL的细胞悬液，PBS（PH7.4）洗涤一次，1000~1500rpm离心5min。

2. 细胞固定：离心后去上清，4%多聚甲醛固定室温固定细胞10~20min。

3. 洗涤离心：1000~1500rpm离心5min，去上清，PBS洗涤一次，离心去上清。

4. 打孔封闭：用含0.2% Triton-X 100的PBS重悬细胞，室温孵育10~20min，1000~1500rpm离心5min去上清。

5. 一抗孵育：一抗稀释后室温孵育30~60min，PBS洗涤两次，离心去上清。

6. 二抗孵育：荧光二抗稀释后室温孵育30~60min，PBS洗涤两次，离心去上清。（如果用的是荧光标记直标的一抗省略此步骤）。

7. 上机检测：PBS重悬细胞，流式细胞仪检测分析荧光值。